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如何選擇合適的PCR板來確定實驗數(shù)據(jù)?

更新時間:2022-07-13      點擊次數(shù):1144
  PCR是一種敏感和有效的方法,用于在短時間內將單拷貝的目標DNA序列擴增至數(shù)百萬拷貝。因此用于PCR反應的PCR板必須避免存在污染物和抑制劑,同時又具有可保障PCR效果的高質量。
  
  那么如何選擇合適的耗材以獲得準確可靠的實驗數(shù)據(jù)呢?
  
  PCR板通常由聚丙烯制成,因為它是惰性的并且能夠承受熱循環(huán)過程中溫度的快速變化。聚丙烯的惰性性質使其對于反應物質的吸收降低至小,確保獲取PCR結果。
  
  為了進一步保障在純度和生物兼容性方面的批次間一致性,應當在生產過程中使用全新未循環(huán)使用的醫(yī)學級或分子生物學級高品質聚丙烯原料。請注意,某些PCR邊框用更強的聚碳酸酯框制成,以與高通量機器人應用兼容。
  
  PCR管和板通??商峁┒喾N不同的顏色形式,以便于對于樣品的視覺區(qū)分和鑒別,特別是在高通量實驗中。盡管耗材的顏色對DNA擴增沒有影響,但在設置實時PCR板的反應時,與透明耗材相比,我們更推薦使用白色耗材,以實現(xiàn)靈敏和準確的熒光檢測。
  
  白色耗材通過阻止熒光折射出管來提高qPCR數(shù)據(jù)的靈敏度和一致性。折射被小化時,更多的信號被反射回檢測器,從而增加信噪比。
  
  此外,白色管壁可阻止熒光信號傳遞至PCR儀模塊,避免被吸收或不一致地反射熒光信號,從而使重復實驗中的差異降低。在少數(shù)情況下,如果熒光探測器由于白色孔的信號反射增強而過飽和,可以使用磨砂孔替代。